Переливание крови и кровезаменителей в хирургии и педиатрии: Учебное пособие. стр.61
2. Появляется возможность длительного хранения гемопоэ-тических клеток в замороженном состоянии как аллогенного трансплантата.
3. Выявлена большая возможность использования не полностью совместимых по НЬА-системе (от 1 до 3 антигенов) трансплантатов.
4. Увеличивается вероятность нахождения редких НЬА-ти-пов трансплантатов.
5. Значительно снижается риск передачи некоторых латентных инфекций, передаваемых трансмиссивным путем.
6. Требуется меньше времени для поиска необходимого НЬА-типа трансплантата.
Технологический процесс заготовки, обработки и хранения стволовых клеток в системе ВюАгЫуе Госпитальный этап (сбор пуповинной крови)
1. Получение согласия роженицы на проводимую процедуру.
2. Обследование роженицы на носительство HbsAg, наличие антител к вирусам гепатита В и С, ВИЧ-инфекции, сифилиса и цитомегаловирусной инфекции (желательно).
3. После отделения плаценты последняя с пуповиной переносятся в помещение стерильной операционной, где подготовленный персонал (1 человек — средний медперсонал) после обработки пуповины в стерильных условиях осуществляет забор крови в комплект для заготовки.
4. Производится маркировка комплекта.
5. Комплект помещается в термоконтейнер и в течение 2 ч доставляется в Банк.
Сбор стволовых клеток из периферической крови
1. Обследование пациента на носительство HbsAg, наличие антител к вирусам гепатита В и С, ВИЧ-инфекции, сифилиса и цитомегаловирусной инфекции (желательно).
2. Мобилизация выхода стволовых клеток в кровяное русло (за несколько дней до сбора).
3. Проведение процедуры цитафереза, сбор фракции стволовых клеток в комплект для заготовки.
4. Маркировка комплекта.
Этап обработки в Банке стволовых клеток (БСК)
1. Регистрация входящих образцов.
2. В стерильных условиях производится забор 5 мл крови на лабораторные исследования.
3. Производится центрифугирование в течение нескольких минут, результатом чего является оптимальное разделение компонентов крови. Плазма первой поступает в мешок для сбора плазмы, далее фракция стволовых клеток поступает в мешок для сбора стволовых клеток, эритроциты поступают в мешок, предназначенный для их сбора.
4. Осуществляется штрихкодовая маркировка мешков и кассет, в которых будет размещен мешок.
5. Образец размещается в кассете и рабочем модуле.
6. Производится регистрация образца.
7. Рабочий модуль с образцом помещается в ВюАгЫуе.
8. Контроль состояния системы осуществляется автоматически.
Лабораторно-днагностический комплекс
1. Прием, маркировка и регистрация исследуемых образцов.
2. Определение групповой и резус-принадлежности гелевым методом (для пуповинной крови).
3. Бактериальный посев на стерильность.
4. Выбраковка образцов.
5. Исследования ИФА-методом на ВИЧ-I и II, HbsAg, вирусный гепатит С, цитомегаловирус, HTLV-I и II, сифилис и ток-соплазмоз.
6. Выбраковка образцов.
7. Выявление генетических заболеваний; талассемий, анемий, дефицита аденозиндезаминазы, агаммаглобулинемии Бру-тона, болезней Харлера и Гюнтера методами кариотипирова-ния с применением FISH и ПЦР.
8. Выбраковка образцов.
9. Реакция ПЦР на ЦМВ и ВИЧ.
10. Выбраковка образцов.
11. Качественный и количественный анализ ядросодержа-щих клеток по CD34, АС133, CD14, КОЕ-ГМ методами проточной цитофлуориметрии и долгосрочного культивирования клеток.
12. HLA-типирование методом ПЦР (кроме персонифицированного хранения).
13. Регистрация полученных результатов с занесением их в единую базу данных.
Клеточные технологии в медицине регламентированы приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации № 325 от 25 июня 2003 г.
Таким образом, в раздел медицинской науки, посвященный изучению регенеративных процессов, сделан большой вклад. На этом пути предстоит сделать еще очень много для того, чтобы познать тонкие механизмы поведения стволовых клеток и находить возможности использования наших знаний в клинической практике.
Литература
1. Барышев Б. А. Справочник для врачей: Кровезаменители. Компоненты крови. —СПб.: Изд-во "Человек", 2005.
2. Корочкип Л. И. // Онтогенез. 2003. Т. 34. № 3. С. 164-166.
3. Корочкип Л. И. Биология индивидуального развития. — М.: Наука, 2002.
4. Румянцев А. Г., Аграненко В. А. Гемотрансфузионная терапия в педиатрии и неонатологии: Руководство для врачей: — М.: МАКС-Пресс, 2002.
5. Практические навыки педиатра: Практическое пособие / М. В. Чичко, А. А. Астапов, О. Н. Волкова и др.; Сост. и ред. М. В. Чичко. — Минск: Книжный Дом, 2005. С 674-696.
6. Приказ МЗ РФ от 25 ноября 2002 г. № 363 "Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови".
7. Приказ МЗ РФ от 7 мая 2003 г. № 193 "Временный порядок каратинизации свежезамороженной плазмы".
8. Приказ МЗ РФ от 16 февраля 2004 г. "О совершенствовании работы по профилактике посттрансфузионных осложнеНИИ .
9. Шевченко Ю. Л., Жибурт £. Б. Безопасное переливание. — СПб.: ПИТЕР, 2001.
10. Фриденштейн А. Я., Лурия Е. А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. — М.: Медицина, 1980.
11. Хлябич Г. Н. Основные направления исследований по созданию перспективных технологий производства кровезаменителей //В кн.: Актуальные проблемы улучшения качества кровезаменителей, консервантов крови, гормональных и органоте-рапевтических препаратов. — М., 1991. С. 3-9.