5) эритроциты, взятые из гемоконтейнеров, на ACD, CPD, CPDA и SAG-Mannitol-консервантах, могут использоваться до истечения срока годности, указанного на упаковке гемоконтей-нера при условии его хранения при температуре 2-8 °С.

6) при использовании эритроцитов, взятых из сегментов гемоконтейнеров, рекомендуется отмыть их физраствором до приготовления суспензии.

Приготовление суспензии эритроцитов для исследования: Приготовьте 1% эритроцитную суспензию с раствором Bromelin Diana (10 мкл исследуемых эритроцитов добавьте в 1 мл раствора). Смешайте. Инкубируйте 10 мин при комнатной температуре (максимум 30 мин).

Необходимое дополнительное оборудование:

- автоматические дозаторы на 10, 25, 40, 50 мкл и 1 мл;

- сменные наконечники;

- шейкер микроплат;

- центрифуга DianaFuge;

- стандартные эритроциты Diana AI/В;

- раствор Bromelin Diana',

- физраствор;

- секундомер.

Техника проведения исследования:

Температура образцов исследуемой крови и реагентов должна быть комнатной.

1. Идентифицируйте (пронумеруйте) каждый образец на микроплате или ряд лунок.

2. Добавьте 40 мкл 1% суспензии обработанных бромелином исследуемых эритроцитов в соответствующие лунки микроплаты.

3. Добавьте 50 мкл исследуемой сыворотки или плазмы в лунки AI и В, а затем добавьте в них же 25 мкл суспензии стандартных эритроцитов Serigrup AI/B.

4. Восстановите лиофилизированные в лунках сыворотки и смешайте их с исследуемым материалом шейкированием на шейкере в течение 5 мин, на средней скорости.

5. Инкубируйте микроплату в течение 5 мин при комнатной температуре.

6. Центрифугируйте в центрифуге DianaFuge.

7. Встряхните микроплату на шейкере 1-2 минуты на средней скорости (до гомогенизации суспензии в лунке отрицательного контроля).

8. Встряхните 1-2 минуты на шейкере на самой медленной скорости для концентрирования агглютинации эритроцитов.

9. Считайте результаты реакции в течение последующих 3 мин и впишите их в прилагаемую таблицу интерпретации результатов, если не используется автоматический ридер.

Оценка результата (табл. 1):

Таблица 1

Результат определения группы крови и резус-принадлежности перекрестной реакцией моноклональными реагентами на микроплатах

 

Исследуемые группы крови

 

Перекрестная

             

реакция

Груп-

Анти-

Анти-

Анти-

Анти-

Анти-

кон-

А1

В

па

А

В

АВ

   

троль

   

О

   

+

+

А

+

+

   

+

В

_

+

+

   

+

АВ

+

+

+

   

Ші (+)

     

+

+

   

КЬ(-)

     

   

Примечания: Агглютинация есть — положительный результат (+); нет агглютинации — отрицательный результат (-).

Внимание:

1. Результат реакции в контрольной микропробирке должен быть всегда отрицательным для правильной интерпретации реакции. Если он положительный, то необходимо отмыть вновь исследуемые эритроциты в физрастворе и приготовить новую эритроцитарную суспензию из них. Если контроль отрицательный, результаты реакции могут быть правильно интерпретированы.


⇐ Предыдущая страница| |Следующая страница ⇒
1